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正文:
细胞通过冷冻和在液氮中储存,可被长期保存
冷藏
通过冷冻和在液氮中储存,细胞可被长期保存。影响细胞冻存成功
与否的重要因素包括冻存速率、冷冻保护剂的类型和浓度及细胞浓度。
尽管采用程序控制的细胞冷冻仪能取得最佳的效果,但使用其他方法也
可控制冻存速率。例如采用一个厚壁的聚苯乙烯盒,放置于一80℃冰箱
中,或放在一个可放人液氮细胞库颈口的特殊装置中,将细胞保持在气
相中,使其慢慢降温。然而这些方法不能像程序降温仪那样在冻存细胞
复苏时获得较高的存活率。避免细胞内冰晶的形成很关键,可以通过以
下几种方法将其发生率减到最低,包括加入冷冻保护剂[如二甲基亚砜
或者甘油]、增大血清浓度、大量的细胞数和缓慢降温。对于大多数哺
乳类动物细胞,最适降温速率为一1℃/min。最常用的冷冻保护剂是10
%(体积分数)二甲基亚砜,这里的实验方案概括性地描述了它的用法,
但对于某些细胞它可能是有毒的(注:二甲基亚砜是一种极性溶剂,可
与溶解其中的任何物质一起渗透人体皮肤,处理二甲基亚砜时要小心,
并戴上防护手套)。
细胞复苏方法也很关键,应避免渗透冲击。冻存细胞应快速融化至
37℃,在培养基中缓慢稀释。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科