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正文:
溶液的过滤除菌
许多用于细胞培养的溶液中含有一种或多种对热不稳定的成分
(如抗生素),或几种成分构成的体系(如磷酸盐缓冲体系),如果将
它们进行高压蒸汽消毒,则会生成有毒的沉淀物。因此,使用膜滤
器对这些溶液进行冷消毒是最普遍的方法。
0.2微米微孔滤膜适于一般情况灭菌;然而,一些环境应激细
菌(如假单胞菌属SP.)及支原体就能够通过这类滤膜。为了能最大
限度地去除这些组织培养中常见的微
生物污染,就要采用孔径为0
.1微米微孔滤膜过滤培养液和血清。滤膜制造商可提供不同类型
的滤膜。就细胞培养而言,醋酸纤维素或硝酸纤维素滤膜通常用于
过滤诸如培养液和缓冲液等液体。值得注意的是,在使用前应该用
热的去离子水冲洗薄膜,清除其中可能引起细胞毒性的可溶性物质
。尼龙膜含较少的表面活化剂或润湿剂等可溶性物质;聚乙烯磺酸
膜中含少量的可溶性物质并很少与蛋白质结合。
细菌和真菌污染可以通过在有利于细菌、真菌和酵母生长的条
件下直接培养而检测。同样地,检测支原体污染的直接方法也可用
微生物培养基促使支原体繁殖,再进行筛查。微生物污染能够通过
使用抗生素而得到控制。微生物污染的检测应列人细胞培养质量控
制的常规项目。微生物和支原体的检测还应在刚收到细胞系时,为
细胞库主库和运作库以及保种所准备的安瓿样本进行检查。这种检
查还可以在任何时候、怀疑有污染、没有抗生素存在而细胞已经培
养了几个星期的情况下进行。
注意:为了避免细胞系不小心被污染,细菌、真菌的检测应在
不从事细胞培养的实验室中进行。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科