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正文:
细胞临时涂片、永久涂片和切片技术的应用
减数分裂染色体的研究
高等植物的减数分裂发生在花药组织中,有花粉母细胞以及胚
珠中的大孢子母细胞。胚珠由数层营养生长的细胞包围,一个胚珠
里面只有一个大孢子母细胞,所以很难观察。另一方面,花药拥有
大量的花粉母细胞,所以将花药挤破就很容易看到。因此,减数分
裂研究所用的材料通常为花粉母细胞。为了研究某个物种减数分裂
中的染色体行为。前期工、中期I和中期Ⅱ是较适宜的时期(图18—
2)。因此,需要选择适宜大小的花蕾来获得恰当的减数分裂的分裂
相。研究减数分裂的方法有I临时涂片法、永久涂片法和切片法等
不同方法。
1.临时涂片法(醋酸洋红染色)
(1)取蕾从一个花序上取一系列的花蕾,包括从最小的到最大
的花蕾,直到找到合适大小的分裂相的花蕾。取材的时问以晴朗的
白天8:0O~14:00都可。如果在田间采集花蕾.可置于醋酸与酒
精之比为l:2的混合液中固定1~2d。在这种情况下,在涂片前只
需转入45%醋酸溶液5~10min,固定的花蕾可贮存在70%酒精中。
(2)固定染色加一滴1%醋酸洋红于一干净无油脂的载玻片上,
用解剖针从一适宜大小的花蕾上挑取2~3个花药,置于固定染色的
混合液中。
(3)涂片用铁解剖刀将花药中的内含物轻轻挤出.去除杂质,
盖上盖玻片,玻片在酒精灯上稍微加热,轻压盖玻片,将多余的染
液挤走。
(4)观察玻片用石蜡封片.
显微镜下观察。如果封片较好该玻
片可在低温下保持
l~4周。
(5)永久制片采用叔丁醇法制成永久片。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科