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正文:
酶活测定通常都是在预定的温度熔点仪
酶的分离与提纯
如果想明了
生物体中酶的行为,必须设法先把酶纯化。然后才
来研究纯酶的物理和化学性质。而为了更进一步深入研究酶活性中
心的结构,催化反应的机理,以及整个酶分子的主体结构,则非把
最后残留在酶中的微量非酶蛋白、其他酶蛋白和大分子化合物予以
清除不可。
分离酶首先要顾及最大的生产量,生产量常用原始酶抽出液中
的总酶活性和以后各步收得的酶活性相比所得的百分数来计算。其
次要顾及最大的催化活性,应尽量使酶中不要有失活或死掉的分子
存在。再其次要使酶纯度尽量达到最高,少含杂质酶和别种大分子
化合物。
从前曾一度认为结晶法能够使酶纯化,不含一点杂质。今天才
知道并不尽然,有些结晶酶并不很纯,而许多纯化手段并不包括结
晶这一步。当然,如果想彻底分析整个酶分子的
立体结构,则非得
到晶形肥大完整的酶的单晶不可。
酶活性的测定通常都是在预定的温度(多为4℃或25℃)和pH(多
为7.0左右)下,用浓度稍过饱和的底物和辅酶,来
测量底物的减
少量,产物的增加量或辅酶的增减量。活性的大小以每分钟底物消
耗、产物生成或辅酶增减的煌mo,数来表示,称作单位u,或国际
单位I.U。
出自http://www.bjsgyq.com/
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