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正文:
假设已经分离到一个能编码一种有商业价值的蛋白质基因。要
把大肠杆菌变为能够大量生产这种蛋白质的工厂。第一个想法可能
是把外源DNA 片段利川前面所讲的方法直接转人到大肠杆菌中。然
而,遗憾的是这种方法并不奏效,一段以浮在细胞质内的随机片段
是不能复制的。这段DNA 必须含有能够被大肠杆菌识别和复制的特
殊复制起始区(replication origin)才行。而一段随机的片段几
乎不可能含有这段序列。但是,如果外源DNA 能够插人到细菌的染
色休上成为其中的一部分—即成功地Y 整合“到染色体上。那它也
可以复制。当要把外派DNA 转人高等动植物。创造转基因植物和动
物的时候,就寄希望于与之近似的整合方法。但在细菌中。一段与
染色体没有很大关联的DNA 片段与染色体的整合几乎是不可能的。
即使真的把外裸DNA 插人到了染色体上。这个外探革因也只有一个
拷贝。不可能有很强的表达。N 且。巨大的染色体也会妨碍对这个
革因进行亚克隆等进一步的操作。
正因如此。必须把目的基因插人到载体上。通常是插人质粒或
噬菌体DNA 中。它们都比大肠杆菌的基因组小得多。而且能够自主
复制,就像外源DNA 序列的携材者。现在有几百种现成的克隆载体,
每一种都兼有其优缺点
出自http://www.bjsgyq.com/
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