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常见的细胞影像系统包含萤光显微镜及雷射共轭焦萤光显微系统，但这两种系统在活细胞影像观察上仍有其限制。
萤光显微镜CCD撷取的讯号包括焦平面上的讯号及离焦讯号，由于每个面的讯号交互作用并叠加，故所得之影像相当模煳，也无法得知细胞内各种物质的3D立体空间构造。
雷射共轭焦萤光显微系统则在侦测器光电倍增管(PMT)前加上pinhole滤除非焦平面上之讯号而使影像清晰，但pinhole也会剔除许多讯号，对于讯号较弱的样品有取像上的困难。而其扫瞄方式是以单点连续扫瞄再组成完整影像，所以取像速度过慢也是其缺陷；再加上使用的光源是能量极强的雷射光，长时间照射样品造成细胞光漂白、光伤害而造成细胞死亡。
Deconvolution是一种将影像经由电脑精密运算以提高影像清晰度及对比的先进影像处理技术。在显微镜上搭配此技术，不但能使影像更清晰、减少样品光伤害，且能延长样品观察时间，甚至还原样品之3D立体资讯。
由于观察细胞影像必须透过显微镜等硬体，一旦讯号透过光学系统，必然会有讯号遭到扭曲或损失，此过程称为convolution。若能知道点光源在光学系统下被扭曲的状况，便可用数学方式将模煳的xyz讯号还原并组成完整影像，此过程称为Deconvolution。
至于影像被显微镜convolution成什麽样子呢？只要在萤光显微镜下观察尺寸小于光学极限的萤光珠子(约50~200   nm)，则每颗珠子可视为一点光源，其经过显微镜发散后得到的影像称为PSF   (point   spread   function)。PSF是一个3D函数(图一)，描述的是点光源在xyz轴上被模煳的情形，而一个生物样品的讯号又可视为许多个点光源的PSF的集合。根据上述，以PSF为基础，将影像进行Deconvolution后，不仅能增加讯号强度，也能改善讯杂比、提高对比及解析度。
目前市面上已有以Deconvolution为基础的高阶影像系统，除了使用Deconvolution技术，系统也可搭配其他硬体，包含使用 CCD快速的撷取影像、能减少光对活细胞样品的伤害的光源、精准的全自动化xyz载物台等，可以简易得到清晰的活细胞影像(图二)。这些先进的影像系统，还可以全自动进行多色观察、时序拍摄、自动对焦、多点拍摄、细胞追踪，亦可依需求加装雷射进行photoactivation、FRET、FRAP、 TIRF等实验，
为活细胞影像研究领域提供了完整且便利的先进工具。

出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科