标题：各种化合物的柱层析分离是生化工作中使用最广泛的技术
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作者:yiyi发布
时间:2016-1-5 22:17:28
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正文:
各种化合物的柱层析分离是生化工作中使用最广泛的技术
层 析
柱层析的实践
各种化合物的柱层析分离是生化工作中使用最广泛的技术之一。
在论述各种类型的柱层析方法之前，先考虑柱子的 准备和操作中
的一般注意事项。
柱子 层析柱一般是玻璃的。长柱的分辨率通常较 高，然而投料量
大时用粗柱更好。
材料备 用于层析分离的材料很多，装柱之前，都要 和溶剂平衡。
此外，常常还需要做一些预处理，如一些凝胶过 滤的材料需要膨
胀，吸附剂需要加热或酸处理活化，离子交换 树脂必须用洗涤法
转变成为需要的离子型。
和溶剂平衡期间，让装柱的材料沉降，用倾析法除掉悬液 中漂浮
的细小颗粒 不去掉这种细小颗粒,它们
就会堵住柱中的空隙，显著减小溶剂的流速。
分部收集和分析 用手工，或更普遍地是用自动分部 收集器将来自
柱子的流出液收集在一系列试管里。该收集器 将预定体积或滴数
的流出液收集到一支试管里，然后移开这 支试管，换上另一支试
管。分析毎一组分中所研究的化合物， 画出洗脱的化合物的S对流
出液体积的洗脱图形。让流出液 连续通过一个流动比色池，测量
在280毫微米或260毫澉米 的光吸收，便能监测每一组分中蛋白质
或核酸的含量。
斑点的检出 许多化合物是无色的，要用特殊的试剂 呈色。施加呈
色试剂的办法，是将呈色试剂喷在滤纸上，或将 滤纸在用挥发性
溶剂配制的呈色试剂里面快速浸一下。在紫 外光下面观察层析图
谱也是有用的，因为某些化合物强烈吸 收紫外光，在紫外光照射
下滤纸发生荧光，而该化合物呈黑 色。另外，一些化合物在紫外
光下呈现特征性的荧光。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科