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正文:
显微镜控制显色方法
全部抗原抗体反应结束后,即置切片于PBS内。可利用
15分钟的洗涤时间,配制50毫升酶作用底物溶液
并准备50毫升醋酸缓冲液和
若干自来水洗缸,如系冰冻切片,尚需要4%甲醛液,以作
固定用。此外,应调整好显微镜的焦距和亮度,显色过程应
在显微镜旁进行操作。
由于影响抗原抗体反应的因素甚多,因而所有免疫组化
染色技术均必须有阳性和阴性对照组,否则就不可能正确评
价染色的结果。一般抗体生产公司在出售商品抗体前,已经
进行过抗体特异性和敏感性的鉴定。尽管如此,我们在使用
每一种新抗体前,仍有必要重复检验该抗体对正常组织和相
关抗原阳性组织等的染色结果,以获得对该抗体特异性与敏
感性的确切概念。可以把这种重复检验工作和探讨抗体稀释
度的优选试验结合进行。
组织的固定和切片制作过程对抗原总有一定影响,因而
充分认识和正确估价各种不同固定液和切片技术对不同组织
包含之各种抗原的影响程度,从而选择合宜的固定液或切片
方法,以达到检测一定种类的组织抗原成分的目的。这是免
疫组化技术中十分重要的一环。一般来说,冰冻切片因未经
任何固定液处理而能较好地保存抗原性,但使用受限,。且不
能作回顾性检查。除设备较好的实验室备有大型一70℃低温
冰箱储存冰冻组织能有计划地进行冰冻切片免疫组化研究
外,很难推广普及此法。由于近代高敏感的免疫组化染色方
法的发展,石蜡切片愈益广泛地被用作免疫组化诊断和研
究。近年来证实,对于某些抗原来说,石蜡切片甚至优于冰
冻切片。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科