标题:荧光显微镜观察细胞恒定流动显微注射实验

信息分类:站内新闻   作者:yiyi发布   时间:2013-12-2 23:21:30 将本页加入收藏

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正文:

荧光显微镜观察细胞恒定流动显微注射实验

◇注射量依赖于注射液中样品浓度、通过针尖的速度和针尖停留在细胞内的时间
◇在某些情况下,利用显微镜载物台控制针下靶细胞的位置,可很有效地使针尖集中
  在小视野内,然后使用操作仪的垂直控制轴刺入细胞中:
◇有时估计出注射量是很重要的,通过注射一些荧光标记物建立了一些标记方法这
  些方法中,一个是荧光标记物的发散强度是可以光测量的(如Rhodamine-dextran)
  二利用注射物的量子发生知识能估计出注射量。然而应强调的是尚没有可
  靠的方法去测定细胞质的体积.因此精确测定最后注射人细胞质样品的浓度足不可
  能的。

◇注射速度过快能扰乱细胞质成分,细胞裂解或细胞从底层移位。当注射体积小于估
  计的细胞体积的50%,并且注射样品的流动速度儿乎不导致可见的细胞质移位时.
  注射的效果最好

◇恒定流动方法需要相当量的样品;
◇这种方法须露出注射和非注射样品细胞的表面。
◇较好的练习方法是注射溶于无钙PBS中。0.01%荧光葡聚糖(10kDa;分子探针),
荧光显微镜观察可证实进行了成功的注射










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