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正文:
在显微镜的观察下,酵母菌细胞为圆形颗粒,即使浓度低,也因酵母菌以出芽方式生殖,
子代与亲代尚未完全分离而集结,浓度低(颗粒计数器小方格内约10个左右)时虽计算较方便,
方格间计数变异大,且刚出芽的子代有时很小,容易忽略,计数每个样品的细胞数所发时间多,
但酵母菌约90分钟可分裂一次,意即90分钟后细胞数增加一倍,时间不宜延迟太久。故一次处理样本数不多。
而与John Wiley 2002所统计分析得计算公式(如下式)相差1 倍。
0.1 OD600=1.8 X 106 cell/mL,故本试验以1 OD600=9 X 106 cell/mL估算细胞个数。
分光光度计在细胞浓度过高时,是否仍遵行上式估计公式,为本试验应考量的因子。
以分光光度计检测细胞数,其吸光值与细胞个数呈线性相关,可依上数之公式套用。
将培养24小时的菌液连续稀释,以分光光度计波长600 nm 测其吸光值套用估算公式其结果,
并取稀释的菌液以分光光度计计算其细胞数,发现在浓度低时,两种测值接近,浓度过高因显微镜仅能
以稀释倍数推估,而高浓度时分光光度计的推估值远低于显微镜的推估值。
此结果建议细胞浓度过高应经过稀释,以免低估其细胞数
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科