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正文:
加以Auramine-Rhodamine
荧光染色法
作用机转
怀疑含有结核菌或其他抗酸性秆菌之组织,可使用以低倍
荧光显微镜 加以快速观察。Auramine O – Rhodamine B为盐基性染料,其
于子外线下会产生荧光。
固定包埋
以10 %中性Formalin缓冲溶液固定。
石蜡包埋切片,5μm厚度切之。
染色方法
1、将切片经T-P脱蜡溶液后水化至无菌蒸馏水。
2、于60 ~70℃将切片置于Auramine-Rhodamine 60 mins.。
3、以Acid Alcohol分化切片至无色,并不时摇动,更换分化液。
4、以蒸馏水洗涤之。
5、以Permanganate Potassium作对比染色2 mins.。
6、以蒸馏水洗涤之。
7、以95 % Alcohol脱水二次,各2 mns.。
8、以Absolute Alcohol脱水二次,各2 mns.。
9、以Xylene澄清二次,各2 mns.。
10、以Permount or Histoclad封盖。
染色结果
抗酸性杆菌 红黄色荧光
背景 绿黑色 本法用药
Auramine-Rhodamine Auramine O 10.50 gm
Rhodamine B 5.25 gm
Glycerol 525 ml H-Q Water 350 ml
所有玻璃器皿皆须以无菌在蒸馏水洗涤干净,将溶液
置于60℃隔夜并过滤,于褐色瓶保留之。 0.5 % Acid Alcohol 70 % Ethanol 995 ml cone. HCl 5 ml
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科