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正文:
培养基的配制&灭菌
一、目的:能了解培养基的种类与用途及其配制方法。
二、原理:
培养基即指可使微生物生长的液体、半固体或固体的营养物质。营养内羹 (Nutrient
Broth,简称NB),适用于细菌液体培养。营养琼脂(Nutrient Agar,简称NA),适用于细菌固
体培养。使用高温高压杀菌法使之达到无菌状况。
三、材料:
1.高压灭菌釜 2.水浴槽 3.螺旋试管 4.三角瓶
5.蒸馏水 6.培养皿 7.酒精灯 8.75%酒精
9.打火机 10.无菌操作台 11.试管架 12.量筒
13. NB 14. NA 15. NB+agar
四、方法:
1. Nutrient Broth (NB):
○1分装于试管8ml→sterilization suspend 13g in 1000ml distilled water.
○2Sterilize by autoclaving at 15 lbs pressure (121℃) for 15 min.
2. Nutrient Agar (NA):
○1倒皿20~25ml
○2NB+1.5%agar→sterilization→50℃水浴恒温→pour plate
3.semisolid agar:
NB+0.75%agar→分装8ml→sterilization→4℃保存
4. NA slant:
NA agar→分装8ml→sterilization→倾斜→凝固→4℃
5.75% Alcohol soln
*计算1.5%及0.75%agar 的量
○11.5%
400×15/100=6g
○20.75%
400×0.75/100=3g
出自http://www.bjsgyq.com/
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