标题：细胞显微针的制备过程-立体体视显微镜厂家
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2013-2-5 11:56:08
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正文:
DNA ES细胞显微注射针及固定针之制备
材料
1.拉针器（Flaming/Brown Micropipette Puller, Model. P-97, SUTTER INSTRUMENT COMPANY）
2.显微针烧针器（Microforge, Narishigi Co.）
3.毛细管 (10 公分长，外径 1.0 mm，内径 0.75 mm)
实验步骤 I (显微注射针之制备)
1.将毛细管架于拉针器上。
2.以参数 Heat 321，Pull 80，Velocity 100，Time 100进行拉针。
3.完成之显微注射针之大小如下图。
4. DNA显微注射针以好用为原则，B 值太大易伤害受精卵，太小则开口易阻塞，故使用者仍应多次尝试、调整最恰当的参数。
5. 参数Pull越大，A值越大且B值越小；Velocity越大θ越小。
实验步骤 II (固定针之制备)
1.将毛细管架于拉针器上。
2.以参数 Heat 321，Pull 80，Velocity 100，Time 100 进行拉针。完成之显微针大小约如下：
3.将针架至烧针器上。
4.调整显微针使在视野下清晰可见，并且维持水平不倾斜。
5.将绕有玻璃球的白金丝移入焦距中，令玻璃球和显微针皆清晰可见。
6.移动玻璃球，使玻璃球和显微针接触，且接触点在视野焦距中为一切点；又接触点的针内径恰为
80-120 mm（视野中可见刻度约5格单位大小）。
7.踩踏脚踏板使白金丝加热（加热强度约40%~50%），见玻璃球泛红后，迅速移动显微针使其和玻璃球
接触，并于接触瞬间放开脚踏板，中断加热，显微针会因热胀冷缩而断裂。如下所示
8.将断裂黏于玻璃球上之部份显微针夹除。
9.移动玻璃球至显微针正前方。
10.踩踏脚踏板使白金丝加热（调整加热强度约为70%~80%），渐渐靠近显微针，利用热源修整显微针
之断面至圆滑，且开口内径仅为10 mm左右（视野可见刻度约为1格单位），切记加热之玻璃球
不可接触到显微针
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科