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正文:
电子显微镜镜检:
本法最大的优点是可以用肉眼直接看到病毒的存在及尚可了解病毒的粒子形
态及大小,唯其缺点是看不到病毒的存在不一定是无病毒,其在诊断上常用的方法
有:
1. 直接阴染法(Direct negative staining)
被检体先以刀片切成细碎片放入一小滴缓衝液中,使病毒从病组织中游离出
来,将被覆 formal 薄膜铜网(grid)沾上此液,置于保湿的培养皿中 2-3 分钟用
滤纸细片吸去多馀汁液,再滴一滴 2%的醋酸铀(Uranyl acetate)或磷酸钨
(Phosphotungstic acid)溶液,同样吸去多馀汁液后,便可在电子显微镜下观察
是否有病毒之存在。
本法对丝狀病毒较容易观察,对于小球形的病毒,则由于未经纯化含有许多
植物成份在内不容易区分病毒,且对不容易游离而出的病毒也难以镜检观察
到病毒。
2. 病毒纯化浓缩后的镜检
罹病材料以适合缓衝液研磨,滤过汁液先用有机溶媒处理,再经低速离心
除去植物正常蛋白后,去淨化后的上澄液,再利用超高速离心机交互离心,
最后所得的病毒沉淀浓缩后,再利用梯度密度离心法,或分子筛孔色层分析
法将病毒纯化浓缩,所得试料再以上述阴染法或真空人工造影后,经电子显微镜观察。
本法因经过纯化浓缩,所以不同种类病毒粒子皆比较容易观察,唯对于有机
溶媒处理,病毒易分解者,即不容易纯化的病毒,诊断较不容易
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科