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正文:
很多种,视需要而定。一般常规的染色为 H & E,量大时用染色机自动进行。由与染色时使用的染料多为水溶性,无法进入蜡中,因此在染色前玻片上的组织必须经过 rehydrate 的过程方能染上,步骤顺序与先前的脱水正好相反,一步步地换回去,这些包括在染色机的功能里头。
H & E 的 H 是为 hematoxylin,事实上不是真的碱(需要媒染剂,并且不会在后续染色中脱落),不过染色结果却类似于碱(带正电)会染上组织中酸性的部分,呈深蓝色,是水溶性的染料;而 E 是 eosin,它是一种酸(带负电),会染上组织中碱性的部分,是红色的,是溶于酒精的染料,因此在染完 hematoxylin 后要再次脱水,才染 eosin。染料的酸碱与其颜色无关。组织中可染上碱性染料的基团(带正电)包括碳酸基(羧基)、磷酸基与硫酸基,三者与碱结合的能力随当下 pH 而改变。组织内的有些物质──比如软骨基质、肝素颗粒,或者粗糙内质网──会对一些碱性染料产生“异染色(metachromasia)”的效果,这是因这些位置含有超多的负电,让吸引的染料产生双或多聚体的聚合,而聚合之后的颜色与原本不同,比如原本是蓝却染成红或紫。
而与碱性染料不同,影响其与组织结合的因素不只是电荷而已,不同的酸性染料可有不同的染色效果。因此可以不同之酸性染料反覆染色,制造颜色叠加的效果,比如 Mallory staining 就用了三种酸性染料:aniline blue、acid fuchsin、orange G。不同碱性染料偶尔亦可重複使用,但应用范围远不及酸性染料广。
染完色后再经 xylene 置换,以非水性的封片胶与盖玻片封好,才是能看的玻片。封片的动作在大量时有封片机,小量时则人工完成。而在这之后,才是真正的镜检。
出自http://www.bjsgyq.com/
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