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正文:
实验目的:了解抗酸性染色法,并观察结核菌的形态,及其病症之探讨。
实验材料:抹片、Carbolfuchsin sol.、acid-alcohol、methylene blue、
显微镜油镜。
实验方法:Acid-Fast Stain又称为Ziehl-Neelsen Method,步骤如下:
作抹片并予以固定。
加入Carbolfuchsin sol.(红色)并用火在其下缓慢地烧(切勿烤焦)大约5 ~ 10 min.。(染料要完全覆盖在 Slide。)
冷却、冲水(现在所有的细菌都是红色。)
用酸性酒精(acid-alcohol)重複滴到红色从抹片上移除。冲水。(在这个步骤,非抗酸菌的红色被酸所移除,但是抗酸菌仍保留红色。)
用methylene blue来做背景染色30 sec.(因为抗酸菌已完全被红色的carbolfusin所填满,它们不能再接受任何背景染色;至于非抗酸菌原来的染色已被酸移除,所以现在染成深蓝色。)
冲水待乾,用显微镜油镜来镜检。
简单地说,加热使得红色的carbolfuchsin可以穿透并可保留这个染料。至于acid alcohol是一种脱色剂,非抗酸菌的红色被移除;而抗酸菌因为有一层蜡状脂肪,使得carbolfuchsin比acid alcohol更为可溶而不易脱色。
实验结果:Mycobacteria呈现红色,而背景则是蓝色的。
Mycobacterium tuberculosis一般呈现带状,在某些情况下会是纤维状、黴菌样,这也是称做myco.的原因(myco在希腊语是黴菌的意思。)
出自http://www.bjsgyq.com/
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