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作者:YIYI发布
时间:2012-3-9 10:53:41
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实验步骤
1.
在培养皿中滴入数滴flush 培养液,并以矿物油覆盖
2.
将培养皿放入37C, 5% CO2培养箱待用
3.
再取兩个培养皿,其一放入适量Hyaluronidase;另一放入数滴flush培养液备用。
4.
将母鼠断颈,腹部朝上放置,以70% 酒精消毒。
5.
在解剖显微镜下以解剖剪刀将母鼠外皮剪开至胸部,接着剪开母鼠皮下肌肉层,至内脏清楚可見,如图示。
6.移开内脏,找出位于母鼠背部兩侧子宫,以器具清除周围组织。
7.
找出输卵管膨大处,于膨大处与卵巢及子宫交界处剪开,单独分離出输卵管膨大的部分。如图所示。
8.
将切出的输卵管放入含hyaluronidase的培养液中,并拿至解剖显微镜下,找出输卵管膨大透明部位。
9.
以小号镊子,在解剖显微镜下小心撕开膨大处,此时内部卵子可轻易顺势流出,接着将输卵管移开。
10.
将卵子于室温下放置约1-2分钟,待周围组织分解后,可清楚在显微镜下观察卵子。
11.
以口吹式毛细管将受精卵吸出移至flush培养液中冲洗数次。
12.
将卵子放入flush培养液中,并放入37C, 5%CO2培养箱中等待显微注射。
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