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正文:

显微镜下检查细胞中钾离子的测定
实验方法：
以生长良好的玉米或豆之叶片作为试材。以Sodium cobaltinitrite作为钾之染剂用以定位钾离子之存在。染剂成份及配置如下：
Na3[ CO（ NO2）6] 6.88克；9.5毫升的水，1.25毫升的冰醋酸。制备好的染剂仅能保存一至两天（使用前和使用期间都必需保持低温），和钾离子产生化学反应后会生成黄色沈淀物，而在硫化铵（ammonium sulfide）的影响下，沈淀物会变成黑色，这个作用可以帮助分辨长条型表皮细胞中钾离子累积的位置。
加入足够盖住两个9公分培养皿底部的蒸馏水。从玉米或豆子叶片下表皮撕下表皮。自其上方切取6个或更多的长条型表皮细胞，并将这些表皮细胞移到一个培养皿中用嘴对其吹气一段时间，置入暗处使气孔关闭。再将此6个长条型的表皮细胞放在第二个培养皿之前，需先放置一个内装有几毫升2 M KOH的表玻璃或浅盘以吸收二氧化碳，将长条型的表皮细胞放入表玻璃或四周充满蒸馏水中的培养皿中，盖上盖子，再将装满冰水之培养皿置于其上以隔热。在这些长条型的表皮细胞上方放一个很亮的灯泡（75-100 W），气孔就会在30分钟内很明显的张开。
当这些叶子进行以上的处理时，就需准备染剂，建议使用小培养皿和小盆子，并将下列的溶液分别放在盘子中：
（1）20 mM冰冷的CaCl2（用来从细胞壁上去除带正电的钾离子），
（2）冰冷的sodium cobaltinitrite染剂；
（3）蒸馏水；
（4） 5％的(NH4)2S
（注意：
(NH4)2是挥发性的且具有刺鼻的气味，故平时应将其存放于抽气柜中，要使用时再倒一些出来，将（1）、（2）、（3）溶液放于装有碎冰的小盆中。
经过以上这两种使长条型表皮细胞气孔打开和关闭的处理之后，需在显微镜下检查光照后表皮细胞的气孔开度，操作时应避免对材料呼气。假如经光照后的气孔大部分都是打开的，而在暗处的气孔都是关的，此时便可开始染色。用镊子由亮处理组的表皮撕片中选取2片，将其放入冰冷的CaCl2溶液2分钟，然后很快的将其放入冷水中清洗，再置入染剂中染3分钟，而此染色过程会导致所有的气孔关闭。将材料拿到冷水中清洗15-30秒钟，此动作的目的是要将多余的染剂去除，然后放入5％的硫化铵中一分钟，然后用水洗去黑色物质，把它们放在显微镜的载玻片上并加水，盖上盖玻片，在高倍率和低倍率下观察气孔。将暗处理的表皮细胞重复上述的实验步骤。
仔细比较经光处理后气孔打开的叶片上被染色的保卫细胞和副细胞的大小。相对的，再比较经暗处理后此两种细胞。画出气孔、保卫细胞和副细胞，用铅笔标示出钾离子所在的位置。
问题：
1. 是否有证据显示在气孔打开前或打开时，是钾离子累积在保卫细胞而不是钠、镁、钙？
2. 从你的结果中是否可推测出保卫细胞累积的钾离子之来源？

出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科