标题:解剖显微镜下塑料包埋切片法

信息分类:站内新闻   作者:yiyi发布   时间:2011-12-4 17:49:51 将本页加入收藏

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正文:

解剖显微镜下塑料包埋切片法
1. 将组织在缓冲液配制之4%的甘油醛(glutaraldehyde)里固定2-6小时。
2. 用缓冲液冲洗三次。假若组织很小则以下第一步到第七步之脱水时间可酌量缩短。
3. 30%酒精---一小时1/2
4. TBA步骤1(50%)---半天
5. TBA步骤2(70%)---半天
6. TBA步骤3(85%)---半天
7. TBA步骤4(95%)---半天
8. TBA步骤5(100%)---半天
9. 纯TBA            每一步骤半天
10. 纯TBA           每一步骤半天
11. 纯TBA           每一步骤半天
12. 0.2%甲苯胺蓝在纯TBA里---半天
13. 用纯TBA快速冲洗
14. 加纯TBA至装满固定瓶的1/5容积(细胞或组织必需被TBA完全覆盖)。然后加等量的纯塑料。旋转混合,确定塑料和TBA完全混合---半天(此时组织必须沉到固定瓶底部)。
15. 再加入等量的塑料,程序如在步骤 14---半天
16. 轻轻倒出混合物后再加纯塑料---一天
17. 重复如步骤 14,如为大块的组织,可斟增加更换纯塑料的次数。
18. 在包埋容器或胶囊中,倒入纯塑料及组织。确定组织在胶囊中适当的位置与方向。
19. 在70℃抽真空之烤箱中聚合12至24小时,视使用之塑料种类而定。
20. 自胶囊中取出,切割后黏在细木棒上,再以玻璃刀切 1-2 厚度。
21. 在涂有黏着剂的载玻片上展平或置于温盘上使它烘干(60℃or 40℃)。
22. 于60℃下在0.2%甲苯胺蓝水溶液中染色(数秒即可)。
23. 用蒸馏水淋洗并烘干。不经封盖玻片解剖显微镜即可观察,照相。










出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科
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