标题：荧光显微技术-激发光的波长细胞成分试验检测
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2018-11-11 2:47:36
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正文:
荧光显微技术-激发光的波长细胞成分试验检测
活体染色中的荧光和荧光染料
荧光是分子吸收光能后直接发光的现象。除极个别外，发射光总是比
激发光的波长要长。发射光的波长决定于荧光物质的分子结构而且并不随
着激发波长而变化。然而，当激发光的波长太长时，则无荧光发生。由此
，为保证在整个可见光谱区域内都能发射荧光，激发光的波长必须比蓝光
短(即激发光波长必须在紫外线范围内)。
荧光显微技术研究显微标本的荧光。Reichert研制了第一台荧光显微
镜，奠定了这项技术的基础工作。
起初，碳弧光用作紫外光源。后来，具有高得多的强度的发射紫外光
的高压汞蒸气灯得到应用。两种光源都会辐射相当数量的可见光和热，这
些光和热必须被适当的滤光片吸收。除滤光片外，可以应用暗视野照明法
以防止光源直接照射物镜。当镜检标本通过暗视野照光时，在物镜和目镜
问则不需要可见光滤光片，因为只有物体发射的可见荧光能到达物镜。在
入射荧光显微术中，初级和次级荧光都不能穿透标本。近年来光学的发展
使得显徽图像的质量改进很大。由于近紫外光可用作激发光，一个高级玻
璃聚光镜就足够了，无需石英镜片。为了保护眼睛，在物镜和目镜间必须
放置吸滤紫外光片。近紫外光对活细胞的损伤也相当小。
被研究的样本本身可篦含有发荧光的物质，被称为初级荧光。另外，
必须让标本与荧光物质接触，然后使荧光积累在标本的特定结构内并用紫
外光辐射而发射出荧光(次级荧光)。在后一种情况下所需荧光物质称为荧
光染色剂或荧光染料，这种活体染色剂通过光的选择性吸收而产生染色。
荧光染料和偏性活体染料一样用于活细胞成分的染色，但是使某一细
胞部位产生可见荧光所需荧光染色剂的量要少得多。因此，在活体染色中
需要使用的荧光染色剂浓度甚低，这就有可能使用那些有一定毒性的荧光
物质。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科