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作者:yiyi发布
时间:2011-11-14 15:09:36
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显微镜下红血球计数_方法?
红血球呢是血液中的的组成部分之一,由身体的骨髓细胞内生成,它的存在的作用是给身体新陈代谢所必须的输送必要的物质,像氧气、二氧化碳、电解质、葡萄糖和氨基酸。
红血球的存活时间比白血球要长,存活时间一般在120天左右,
我们下面来教大家一下怎么计算出血液中的红血球数量单位体积。
红血球之计数,用血球计数盘,血球计数盘有二吸管及一计算盘,血球计算盘一般皆用厚玻璃裂成。
血液稀释:红血球计数用之稀释液为:
a. Hayem's fluid 其成份为:
氯化汞 Mercuric Chloride 0.5 gm.
硫酸钠 Sodium Sulphate 5.0 gm.
氯化钠 Sodium Chloride 1.0 gm.
蒸馏水 Distilled water 200.0 cc
b. 生理食盐水 Physiolgical salt solution
方法: (1) 取红血球计数器内的吸血管 ( 採用球形膨大部上方有 101 刻度之吸管 ), 吸血管须清洁乾燥,吸取血液至 0.5 刻度处,吸时宜缓而匀,如吸时有气泡入管则须重做。
(2) 用滤纸迅即擦去粘附于吸管尖端周边部之血液,插吸管尖瑞入稀释液,吸稀释液入吸管,吸时轻轻旋转吸管,并将吸管置于垂直的位置,以防大气泡进入球形部份。待稀释液吸至 101 刻度处后取出吸管。
(3) 将橡皮管取下,分别以右手拇指和中指堵塞吸管二瑞,极力振盪约一分钟。使血液和稀释液充分溷和。
10.1. 1.2计数
红血球稀释液准备妥善后先吹去 2~3 滴,拭乾吸管之尖端然后将吸管之尖端触盖玻片及计算盘中间部份之相接处,吸管内之液体因毛细管之吸引作用而进入盖玻片下。进入盖玻片下之红血球稀释液不宜过多,否则盖玻片浮起,由此计得之红血球数即增多,若流入计算盘之红血球稀释液之量适宜,则几全部位于盖玻片下,不至遍及凹沟,且亦无气泡,如无此种良好之结果,此步应重作。
略待数分钟红血球稳定后,以低倍数显微镜检查红血球分佈是否均匀,如分佈不匀,则须拭淨计算盘,重行滴入红血球稀释液。
一切预备完毕后,以高倍显微镜计数红血球,同时调节聚光镜使光线适宜。计算盘在四角及中央各选一中格计五格 ( 每一中格有 16 格 ) 计算其红血球的数目,记录于簿上,五中格计算完毕后,计得 80 小格的总数,又血球如恰在格线上者,则取拾规则均须一律。
10.1. 1.3.计算法:
如设此数为E时,每 1㎜3 中之总数 X 可由下式算出,
400
X = E × ----- ( 全部之小格 ) ÷0.1 ( 盖玻片至计算盘之深度 ) × 200 ( 稀释倍数 )
80
= E × 10,000
操作时除逐部注意,以防发生错误外,下列各点亦常为计数不准确的原因: (1) 进入吸管之血液过多或过少或释度不确。
(2) 操作过慢致使一部血液凝固。
(3) 稀释液配置过久内有酵母细胞与血球溷淆。
红血球计算完毕后,吸管及计算盘须立即洗淨,吸管可按序用水,70%,80%,95% 酒精、乙醚清洗。洗时可用口吸上述液体入吸管,然后吹去,但以橡皮球或唧筒较佳,因用口时呼气内的水分常附着于吸管内壁。倘吸营内有凝血块附着,可用马尾通出,然后用浓硫酸洗淨或置吸管于盛酸液之试管内过夜。计算盘用洁淨之软布沾水拭后擦乾即可。
正常禽畜的红血球数目 ( 百万/㎜3)
马 6.5~9.4 猪 5.0~9.0 猴 4.8~6.2
兔 4.5~7.0 鸭 2.8 牛 5.4~9.0
水牛 5.4~7.4 犬 6.4~8.0 火鸡 2..24~2.37
鹅 2.71 绵羊 8.5~13.5 猫 6.2~10
鸡 2.8~4.5 山羊 12.5~22
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