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正文:
FISH—MAR在研究地质微
生物上主要的限制是:(1)它需要提前了解
相关生物(们)的系统发育关系;(2)在单一的FISH实验中能特异检测到
的生物数量受到可发
荧光强度的限制(现在小于10);(3)一些地质微生
物样本可能不适用于FISH分析,沉淀物/土壤部分可能掩盖了存在的细
菌;(4)地质
微生物偏好的放射活性基质可能不存在。前三条限制可以
由分子技术克服,例如稳定同位素探针(SIP)或同位素阵列(以后描述)
;第四条限制在一些情况下可以靠同时包埋样本与非标记复合物培养基
以及标记的14CO,来克服。这项技术叫做Het CO:一MAR技术,它利用
了在生物合成中大多数异养菌的羧化反应吸收CO:。另外,HetCO:一M
AR技术区分在底物消耗而非增殖情况与有生长条件下的不同方面比(例
如在储存的化合物中)传统FISH—MAR技术更好,因为通常认为生长需要
羧化反应。然而,这项研究重要的附加条件是自养能快速利用标记的14
CO:培养基,因此假如异养是目标,一定要加入特异的自养抑制剂来避
免错误的激活,以防出现假阳性。另一个FISH—MAR的可能限制是需要
激活细胞结合的培养基(如果样本中对代谢有偏好的生物数量少,可能
会丢失重要的生物)。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科