标题:克服高解析度显微镜遭遇到失焦的障碍!!

信息分类:站内新闻   作者:yiyi发布   时间:2011-11-14 1:00:09 将本页加入收藏

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正文:

但超高解析度显微镜究竟是不是也会遭遇到失焦的障碍?衍射现像的发生是当我们在做显微观察时,通常将焦点放在单一点(或分子)上,这个焦点的位置是定位在观察物反射光的中心位置;但当我们要观察的目标出现多个反射光点时,此时两个以上的光点将会出现重叠现象使得我们无法找到观察目标的真正位置。也就是研究员要有办法随时开关各个观察分子的亮光。要达到这项目标,研究员则须利用基因改造方式将观察细胞内引入萤光蛋白体,而两条雷射射线原则上可以只让某几个研究员想要观察的分子同时发亮,也因此,这些萤光细胞便成为显微镜下的观察影像焦点,当研究员以这个方式观察一部分的细胞表面组织后,他们将必须反覆重複同样的步骤,直到全部观察完所有的表面组织为止。反之,如果细胞没有经过萤光基因改造的话,科学家将无法研究细胞表面的分子结构,也不能在须臾间掌握分子的运动轨迹,而且经过基因改造后的萤光分子仅能维持不到一秒的发光时间。

现在,分子无线光学研究中心与神经突触细胞生理学实验室的生物学家(隶属于国家科学研究院与波尔多大学的研究室)发明了一种新的技术来让细胞分子「发亮」,这个原理便是使用即时免疫性染剂(immuno-marquage en temps reel),受测的活体细胞被放在一种具有萤光抗体的溶液中(这种溶液有在市面上贩售,所用的抗体要依观察目标而作改变),使得萤光抗体融入细胞中,不过研究员不需要让所有细胞都染上这样的抗体,而是将萤光染剂注入到显微镜中,在观察的过程中,一部分的抗体会自动与欲观察的分子进行联结进而使其发光,随后,当这部分的萤光消失后,其他部分的分子则会在逐步的观察中自动地接受到显微镜内存的萤光染剂而逐一发光。

这项技术得以让研究人员纪录数以千计的单一细胞分子之运动轨迹,并且可以奈米层级观察这样的动态现象,国家科学研究中心与波尔多大学的研究员也向世人展示了这项技术具有高度效率以及可在各种不同的细胞系统(异质细胞、突状纤维细胞或我们一般所说的神经细胞)内观察内膜组织中的各种分子。这项技术不仅使用简单、用途广、并且十分可靠,从今以后一般大众就算没有传统的光学显微设备也可以进行细部的细胞分子观察。更特别的是,我们甚至也可以以每秒50奈米的解析度拍摄诸如神经元等单一细胞的活动变化(相当于一般摄影中每秒20个画面)。波尔多大学的研究学者已经开始以此观察活体神经突触内神经接受器的动态结构。相信有其他许多研究团队也会陆陆续续採用这项技术,届时可以预期生物界将会颳起一阵研究观察的革命。











出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科
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