标题：食品微生物学实验室检测-微生物鉴定显微镜
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2017-8-14 23:37:35
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正文:
对许多食品微生物学实验室而言，这些检测方法要求的技术较
复杂。除此之外，还有两个问题需要解决:一个是PCR反应的抑制剂
;另一个是如何区分活细胞与死细胞。食品中存在很多酶、蛋白质
和其他化合物，它们可能干扰PCR反应从而导致假阴性结果。这些
抑制剂必须被清除或稀释。既然PCR反应能扩增目标DNA，那么来自
死细胞的DNA也可以被扩增，因此含有沙门菌死细胞的食品也能检
出沙门菌阳性结果。在这种情况下，烹饪过的但仍然含有沙门菌死
细胞DNA的食物就没有必要因为阳性的PCR检测结果而被销毁。一旦
所有这些问题得以解决，PCR技术可以成为食品中微生物检测的一
种非常有效的手段，如此，分析人员就能在常规食品分析中采用该
技术。
上述遗传检测方法可用于检测食品和其他样品中的目标病原菌
，但不能将微生物鉴定到种或亚种水平，而这种鉴定结果在突发的
流行病学研究和常规的环境微生物检测中是非常重要的。下面重点
讨论细菌的遗传分类学进展。
RiboPrinter微生物鉴定系统(DuPont Qualicon, Wilmington,
DE)可以自动地将微生物鉴定到属、种、亚种的水平。为了得到一
个微生物的RiboPrint分析结果，需进行如下步骤。
(1)使用无菌塑料棒从琼脂平板上挑取可疑目标微生物(如沙门
菌)的单菌落。
(2)通过机械搅拌使塑料棒上的细胞重悬于缓冲溶液中。
(3)取出一份细胞悬液加人载样台，将其放置于仪器中。每个
载样台可同时容纳8个菌落样品。
(4)仪器使用裂解液和限制性内切酶裂解细胞，释放细胞内容
物并切断DNA分子。DNA片段通过凝胶电泳分离成若千条带。接着，
DNA探针与目标DNA片段杂交，杂交片段产生的荧光被拍摄下来。该
数据保存后会与已知微生物样品的数据进行比较。对于8个样品的
处理过程约需8h。但实验结束2h后，即可对新一轮的8个样品进行
分析。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科