革兰氏染色法需要准备的药品与器材？以及步骤？
信息分类:金相实验仪器专题-技术应用
作者:yiyi发布
时间:2012-4-8 23:42:12
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药品与器材
药品
1. 95%酒精
2.蒸馏水
3.长有Top10 E. coli之液态培养菌液
4. LB agar plates：1% (w/v) Bacto-tryptone, 0.5% Bacto yeast extract, 1%
NaCl，调至pH 7.0后，加入1.5% (w/v) Bacto agar，以湿热法灭菌。
器材
1.接种环
2.三角玻棒
3.酒精灯
4.试管
5.试管架
6.封口蜡膜(parafilm)
实验步骤
(一)细菌之接种方法—分区划线法(Streaking method)
1.每一组取一个LB plate，在培养皿底部标明组别及日期，并写上菌株名
称：如“Top10 E. coli “。
2.将接种环在酒精灯火焰上烧红，环上方部份亦以火焰烧过，将接种环在培养基空白处轻戳以使冷却。
【注意！ 盖子请勿全开或置于实验桌上！
此时接种环请勿放置在桌上或接触到其它东西！ 】
3.用右手小指及手掌心将Top10 E. coli之液态培养菌液试管盖子打开
(盖子夹在小指及手掌中)，以接种环轻触菌液，使接种环上沾有细菌。
4.打开空白的LB plate，将沾有菌落的接种环于其上轻轻连画数条线后，将培养皿盖子盖回。
5.再次将接种环在酒精灯火烧红并使冷却。 将培养皿旋转约60度，画第二次线。
6.重复上一步骤之操作，画第三次线或第四次线。
7.将接种环在火焰上烧红灭菌后置回实验桌上。
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