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萤光显微镜（Fluorescence Microscopy）在生物学上的应用
显微镜是研究生物学必备的工具。其实，拜工业科学的进步，许多材料工业和电子晶片的生产与研发，也需要显微镜的帮忙。所以，目前已经不是研究生物学的领域才需要使用显微镜。本文章将说明萤光显微镜的原理，以及在生物学上的应用。

传统的光学显微镜，不论正立或倒立，或是解剖显微镜，都是藉由一般的滷素灯泡光源，来观察物体。而萤光显微镜的光源，则是藉由全光汞灯源（包括紫外线白光），并藉由特殊的滤片来观察生物体的萤光物质，或是经由人为染色的分子。而这种萤光显微镜，已经扩展到实体显微镜（解剖显微镜）、正立显微镜和倒立显微镜。

萤光显微镜的基本原理，是藉由一个高能量波长的光线，激发出一个较低能量波长的萤光。一般而言，蓝、紫色的波长较短，能量较高，可以激发出绿色或红色的低能量萤光（图一，A）。加上适当的滤镜组，便可清晰的看到或撷取萤光影像（图二，B）。像植物细胞的叶绿体，内含叶绿素，接收到蓝光或紫光，这种高量的光，会激发出红色的萤光（图二）。还有来自水母（Aequorea victoria） 的绿萤光蛋白Green fluorescence Protein (GFP) (Shimomura et al., 1962)，接受到高能量的蓝光或紫光激发，会产生绿色的萤光（图三）。GFP 这种萤光蛋白，经过多年的研究，已经生产许多人为变异的萤光蛋白，如黄萤光或红萤光等。以上这些萤光物质，不需要外加染剂染色，所以细胞不会经由人为染色杀死，甚至可以作生物活体观察，相当方便好用 (Jouvenet et al., 2008)。

再者，细胞内的分子与胞器，必须藉由特殊的染剂来标示该分子或胞器的所在位置。最常用的染剂是抗体。特殊的抗体可以标定特殊的分子。若该抗体再以人为的方法键结萤光物质，就可以再以萤光显微镜，来观察该分子或胞器在细胞内的行为或形态。

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