信息分类:技术文章
作者:顾怡婷发布
时间:2011/9/23 18:06:18
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萤光显微镜的结构和配件
1. 必要的条件
萤光显微镜为了利用上述的萤光特徵,因此比之普通显微镜还需要具备下列条件。
A. 光学暗视野
通常萤光的强度和激励光相比,是极微弱的(10-3 ~ 10-5 )如果萤光和激励光相叠加,反差就会极度地减弱,因此,必须把激励光和萤光彻底地分离出来。
B. 必须有短波长区(近紫外区)并用一种高强度的光源。
C. 必须有合适的滤光镜组合,以适应各种需要的目的。
D. 必须安全和便利操作(由于光源的高温和有害的紫外光)。
E. 必须对萤光衰褪现象,有合适的防止措施。
2. 光源
由于萤光和激励光相比,是非常微弱的,因此萤光显微镜的光源强度必须很高,即使在近紫外区,也必须有足够的强度,为了满足上述要求,通常採用高压汞灯,但有时为了特殊需要,也採用氙灯或卤素灯。
A. 高压汞灯
该灯发射出波峰窄的发光光谱,萤光显微镜是利用它的紫外- 短波区的光线。
常用的有200W、100W和50W三种不同型号的灯,但每种的强度和光弧形状都不一样,必须根据照明系统的情况,选择合适的型号。
HBO-1OOW 0.25 × 0.25mm 170.000 cd/cm
HBO-200w 2.0 × 0.6 mm 33.000 cd/cm
B. 氙灯(XBO)
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该灯与高压汞灯不一样,自紫外至近红外区是一条连续光谱。同时,特别在可见区,这灯和自然光十分相似。因此,它适用于萤光光度法中,作测定激发和萤光光谱之用。
汞灯和氙灯都是放电电弧,在玻璃管中封入一对电极和一些特定物质,并使电极之间放电。根据激发和压力条件,封入的物质(气体)辐射出一种特定的光谱。需要有高电压当然代价也贵了。
C. 卤素灯
是一种光学显微镜作为光源最常用的灯。它和放电灯相比,使用方便,价格便宜,因此可用在不需要紫外线区或高光强激励光的观察中(如FITC)。
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